你好首先祝你早日恢复降我来和你谈谈丝虫病的问题根据<中华人民共和国传染病防治法>及<中华人民共和国传染病防治法实施办法>制定本标准1主题内容与适用范围本标准规定了丝虫病(班氏丝虫病和马来丝虫病)各期,即微丝蚴血症,急性丝虫病和慢性丝虫病的诊断标准,治疗方法及防治原则本标准适用于疫区专业机构开展丝虫病防治工作和各级卫生防疫,医疗保健机构对丝虫病患者的诊治2诊断原则根据流行季节丝虫病流行区居住史,临床表现以及病原学检查,血清免疫学检查等予以诊断3诊断标准3.1微丝蚴血症3.1.1流行季节流行区居住史3.1.2夜间采血检查微丝蚴阳性确诊病例:具备3.1.23.2急性丝虫病3.2.1流行季节流行区居住史3.2.2有反复发作的非细菌感染性肢体(或阴囊,女性乳房)淋巴结炎/淋巴管炎(或精索炎,睾丸炎,附睾炎),局部疼痛,触痛,肿胀,温热感,或有丹毒样皮炎,症状持续超过3天,伴有发热,头痛,不适等全身症状注:马来丝虫病急性炎症局限于肢体3.2.3夜间采血检查微丝蚴阳性3.2.4间接荧光抗体试验或酶联免疫吸附试验检测抗体阳性疑似病例:具备3.2.1,3.2.2确诊病例:疑似病例加3.2.3或疑似病例加3.2.43.3慢性丝虫病3.3.1较长期流行区居住史3.3.2有不对称性肢体淋巴水肿,象皮肿,鞘膜积液,乳糜尿以及阴囊或女性乳房肿大(马来丝虫病慢性体征局限于肢体淋巴水肿,象皮肿,且肿胀处限于膝,肘关节远端)或兼有3.2.2的表现3.3.3夜间采血检查微丝蚴阳性3.3.4间接荧光抗体试验或酶联免疫吸附试验检测抗体阳性3.3.5在尿,淋巴液,鞘膜积液(或其他抽出液)内查见微丝蚴,在淋巴管,淋巴结内查见成虫,或在病理组织切片查见丝虫断面疑似病例:具备3.3.1,3.3.2确诊病例:疑似病例加3.3.5或3.3.3或3.3.44处理原则4.1病原治疗4.1.1个体治疗4.1.1.1班氏丝虫病一般用海群生(乙胺嗪)总剂量4.2g7天疗法(总量70~84mg/kg),即每次0.2g,每天3次,连服7天(成人量,儿童用量应递减,孕妇,哺乳期妇女及有严重疾患者应缓治或免予治疗,下同)为一疗程,需复治2~3个疗程,间隔半月以上4.1.1.2马来丝虫病一般用海群生总量2g的4天或2天疗法(总量33~40mg/kg),即0.5g顿服,连续4天或0.5g,每天2次连续2天,复治2~3个疗程,间隔半月以上对微丝蚴密度较高者,首次治疗宜用海群生1g10天微量递增疗法(即第1~4天,每天12.5mg;第5~7天,每天25mg;第8~9天,每天50mg;第10天补足1.0g顿服)4.1.2群体治疗4.1.2.1班氏丝虫病4.1.2.1.1人群微丝蚴率在10%~20%的地区,于血检普查后,采用全民普服0.3%海群生药盐6个月(海群生总量约9g),对检出的微丝蚴血症者再用海群生3g5天疗法,即每次0.3g,每天2次,5天为一疗程,治疗2~3个疗程,间隔半月以上4.1.2.1.2人群微丝蚴率在5%~10%的地区,于血检整群抽样调查后,全民普服0.3%海群生药盐6个月4.1.2.1.3人群微丝蚴率在5%以下地区,采取普查,对微丝蚴血症者用海群生3g5天疗法治疗2~3个疗程,间隔半月以上4.1.2.2马来丝虫病4.1.2.2.1人群微丝蚴率在5%~10%的地区,采取普查,对微丝蚴血症者用海群生总剂量2g的4天或2天疗法治疗3~4个疗程,间隔半月以上;亦可采取全民普服0.3%海群生药盐4~6个月4.1.2.2.2人群微丝蚴率在5%以下地区,采取普查,对微丝蚴血症者用海群生2g的4天或2天疗法治疗2~3个疗程,间隔半月以上4.1.2.2.3群体治疗时间以冬,春季节为宜4.2对症治疗(详见附录C)4.3媒介防治4.3.1结合环境整治和新农村建设,清除蚊媒孳生地4.3.2提倡使用蚊帐,纱窗,纱门等防蚊设备和应用驱蚊剂4.3.3在有嗜人按蚊的马来丝虫病流行区,可结合疟疾防治开展杀虫剂室内灭蚊附录A病原学检查(补充件)A1血液检查A1.1厚血膜法A1.1.1血片制作:于晚9时至翌晨2时,以酒精棉球消毒耳垂(或指端)待干,用三棱针快速深刺,轻挤出血液,取血3大滴,约等于60μL,置于已编号的清洁载玻片上,涂成边缘整齐,厚冰匀的椭圆形或长方形厚血膜(约长3cm,宽1.5cm),平放于有盖的玻片盒内,以防落灰或虫吃A1.1.2血片染色:次日,将经自然干燥的血片放入清水中溶血5~10min,至血膜呈乳白色,取出晾干,甲醇固定,染色大规模普查可用硼砂美蓝染色,鉴定虫种及保存宜用吉氏液或苏木素染色A1.1.2.1硼砂美蓝染色法:取美蓝2g,硼砂3g,置研钵内,边研边加水,待溶解后冲洗入瓶中,加蒸馏水100mL配成原液,过滤后放置备用染色时取原液5mL加清水配成5%稀释液,染3~5min,使血膜呈天蓝色,然后用清水轻轻冲洗本法染色前可不必先溶血,固定A1.1.2.2吉氏染色法:染液由吉氏粉0.5g,中性甘油25mL及甲醇25mL配成先置染粉于研钵内,加少量甘油充分研磨,边研边加,至甘油加完为止,然后倾入100mL玻塞瓶内,用甲醇小量多次洗涤甘油染液倾入瓶内,塞紧瓶塞,充分摇匀,置于55~60℃温箱内24h或室温下3~5天,即为原液,放置愈久染色效果愈佳,临用时稀释将溶血后已干的血片用甲醇固定约1min,然后滴加10%染液(原液加清水稀释配成)染45min,用蒸馏水轻轻冲洗A1.1.2.3德氏苏木素染色法;染液由A液即铵明矾饱和液(铵明钒20g,蒸馏水100mL);B液(苏木素结晶1g加纯酒精10mL);C液(甘油25mL加甲醇25mL)配成将B液逐滴加入A液中,倒入一不盖紧的容器内,置于空气流通处,经2周至1个月使其充分氧化,过滤后加入C液,密封备用血片溶血固定步骤同前用上述染液染10~20min,用0.05%~0.1%稀盐酸脱色片刻,流水冲洗至血膜呈蓝色A1.1.3血片镜检:将染色的血片在低倍显微镜下顺序逐个视野检查微丝蚴并计数,根据微丝蚴的大小,体态,折光性,有无鞘膜,表皮是否光滑及内部结构等特征,予以识别在高倍镜下观察微丝蚴的体核及头端空隙,神经环,排泄细胞,排泄孔,肛孔,尾核等结构必要时需要用油镜作进一步鉴别A1.1.4班氏与马来微丝蚴形态鉴别要点见表A1表A1A1.2微丝蚴浓集法A1.2.1改良蒸馏水法:炔脉血1mL(取血时间同A1.1),置于盛有0.4mL3.8%枸椽酸钠的离心管内,混匀后加蒸馏水8~10mL,反复摇匀,待红细胞溶解后经每分钟3000转离心3~5min,倾去上液,加0.05mol/L氢氧化钠8~10mL,按住管口,用力振荡数次,放置5~10min,使纤维蛋白凝块迅速溶解,再离心,吸除上清液,将沉渣涂片,待干,染色,镜检A1.2.2微孔膜过滤法:将已编号的直径25mm,孔径5μm的微孔薄膜经蒸馏水漂洗后装入过滤器内,滤膜下垫一张同样大协生理盐水润湿的滤纸用注射器炔脉血1mL(取血时间同A1.1),加5%构椽酸钠0.1mL抗凝,吸入10%聚氧乙烯脂肪醇硫酸钠［或可用2%吐温80,0.1%碳酸氢钠或10%聚氧乙烯脂肪醉硫酸钠(ES)］溶液9mL,混匀后,去针头,直接插入过滤器,缓慢推动注射器,使已溶血的血液通过滤膜,以10mL生理盐水洗涤滤膜3次开启过滤器,取出薄膜,自然晾干后,置热苏木素中染色5min,水洗,待干,镜检A2淋巴液,鞘膜积液,乳糜尿内微丝蚴的检查A2.1淋巴液,鞘膜积液(或其他抽出液):直接涂片或用生理盐水稀释10倍离心后检查沉渣液体蛋白含量高而呈胶状易凝者,加抗凝剂后检查A2.2乳糜尿(或乳糜积液):取乳糜尿4mL于试管中,加乙醚2mL,混合振摇,使乳糜中脂肪充分溶解,弃去上层脂肪,加水稀释10倍后离心检查A3活体组织检查A3.1检查淋巴管,淋巴结内成虫:将手术取出的结节,用大头针固定于木板或软木板上,分离结节周围组织,仔细将病变的淋巴管壁切开,分离内容物,取出干酪样脓样物检查如于结节出现2周以后切除,解剖,则管内脓样物可能已纤维化脓样物内含大量巨噬细胞,单核细胞,嗜酸粒细胞及夏雷晶体将干酪样物或纤维组织移至玻片上,加数滴生理盐水,然后用解剖针将外层组织分离,即可见被包围的成虫时间较久者发生粘连,虫体成碎段,不易将虫体与组织分离,则可用一针将包围的组织固定,另一针将虫体沿其长轴向一端轻移,或将组织移至盛有生理盐水的培养皿中,使虫体半浮,较易分离但如结节形成较久,则不易取得完整的成虫成虫或虫段可保存于甘油酒精(70%酒精95mL,甘油5mL)中供鉴定A3.2病理组织学检查:切下可疑的淋巴结,淋巴管结节或其他组织,用10%中性甲醛固定1~2天,移至70%酒精中作病理切片在切片中除可发现丝虫成虫外,尚可见到嗜酸粒细胞,网状内皮细胞,淋巴细胞,浆细胞,纤维母细胞,异物巨细胞,肉芽肿,假结核,纤维组织增生,淋巴管周围炎,管腔内肉芽组织增生形成栓塞或息肉状阻塞管腔等病理变化在切片中所见结构清楚的雌虫体内的微丝蚴体核清晰,所在淋巴管壁有少量浆细胞,淋巴细胞和嗜酸粒细胞浸润,而无纤维素沉积或肉芽肿形成者,则成虫可能为活虫如虫体周围有较多的嗜酸粒细胞和散在的组织,虫体被炎细胞包绕形成肉芽肿,纤维化后形成纤维化结节,或结节内虫体已钙化,则均为死虫如出现中性粒细胞浸润,渗出,内膜内皮细胞肿大,增生,则为继发性细菌感染附录B血清免疫学检查(补充件)B1间接荧光抗体试验(IFAT)B1.1抗原片B1.1.1马来丝虫成虫冰冻切片抗原:用马来丝虫感染期幼虫腹腔感染长爪沙鼠6个月后,从感染鼠腹腔收集雌性成虫用生理盐水洗涤2次,蒸馏水漂洗1次,包埋于3%~5%甲基纤维素中,用冷冻切片机制成厚4~5μm的切片(每一切片含4~6个虫体横断面),贴附于洁净的载玻片上,用丙酮固定,干燥保存于-20℃备用B1.1.2马来微丝蚴断片抗原:从感染马来丝虫的长爪沙鼠腹腔液中收集马来微丝蚴,用PBS(或生理盐水)洗净其悬液置冰格过夜,次日离心浓集,以甲醇固定,然后进行反复超声断碎,超声粉碎机输出功率不小于25W(每次30s,间隔30~60s,共3~5min),至微丝蚴断片为长20~30μm滴1滴微丝蚴断片悬液(≥100断片/滴)在洁净的载玻片上,经50℃左右热烘固定3min后使用B1.2血样:血清或滤纸血B1.2.1血清:采集受检者的静脉血或末梢血,离心后收集血清在低温下运送,4℃保存,-20℃可保存2年左右其间不宜反复冻融,以免影响抗体效价B1.2.2滤纸干血滴:用定量新华滤纸从受检者的耳垂或指尖取血,使血滴直径为1.2cm,血量约20μL(约相当血清10μL),编号,晾干后放入有干燥剂的塑料袋内低温保存4℃可保存半年,-20℃可保存2年B1.3操作方法:受检血清用pH8.0,0.01mol/LPBS稀释成1∶10或1∶20(每一滤纸干血滴在0.1或0.2mL的PBS液中浸泡30min)从冰箱取出抗原片,待复温后,在每一切片或一滴抗原上加1滴稀释待检血清,置37℃湿育30min用PBS洗3次(每次5min)后冷风吹干,滴加用PBS稀释的羊抗人IgG荧光抗体,同上湿育,洗涤,以0.01%伊文思蓝作背景染色2min,同上洗涤,吹干再加缓冲甘油(pH8.0)后覆以盖玻片在荧光显微镜下检查对阳性反应的血样需连续作倍比稀释检测,直至阴性反应为止最后呈阳性反应的稀释度即为阳性终点滴度B1.4反应标准B1.4.1马来丝虫成虫切片抗原,以虫体切面的荧光强度及荧光着色范围区分为4个等级:-虫体切面呈桔红色,无明显的黄绿色荧光;+一般亮度的黄绿色荧光,显色范围较局限;+中等亮度的黄绿色荧光,显色较广泛;+明亮的黄绿色荧光,显色广泛一般以1:20血样滴度时荧光反应强度呈+及其以上者,判为阳性B1.4.2微丝蚴断片抗原,以微丝蚴断片的荧光强度及着色范围区分成4个等级:-微丝蚴断端呈模糊的淡黄绿色或红色:+断端呈黄绿色荧光,形似哑铃,反衬红色明显;+断端黄绿色荧光显著,膜上也有黄绿色荧光;+断端和膜均呈明亮的黄绿色荧光一般以1:10血样滴度时出现+及其以上的荧光反应,判为阳性B2酶联免疫吸附试验(ELISA)B2.1抗原:马来丝虫成虫可溶性抗原,从感染马来丝虫长爪沙鼠的腹腔收集马来丝虫成虫虫体经生理盐水洗涤和蒸馏水漂洗后,置丙酮脱脂干燥,然后加0.01%硫柳汞生理盐水研磨成匀浆,冻融3天(每天2次)后置4℃冷浸3~4天,超声粉碎后低温高速(7000r/min)离心30min,上清液即可溶性抗原用分光光度仪测定235和280nm波长处的光密度值(OD),按式(B1)计算抗原蛋白量:X(mg/mL)=(OD(下标始)235(下标终)-OD(下标始)280(下标终)*0.4-(B1)B2.2操作方法B2.2.1常规间接ELISA:用pH9.6,0.05mol/L碳酸盐缓冲液将抗原按适宜的工作浓度(2~5μg/孔)稀释,包被聚苯乙烯反应板,每孔加0.3mL,4℃过夜次日倾去抗原液,用pH7.2PBS/吐温-20(PBS/T)洗涤3次,每次5min,甩干受检血清(或滤纸干血滴)用PB3/T稀释成1∶200,每孔加0.3mL,每样本加3孔,置湿盒于37℃湿育2h,同上洗涤,甩干每孔加入0.3mLPBS/T的辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG,同上湿育,洗涤,甩干然后加底物溶液［邻苯二胺40mg,柠檬酸-磷酸盐缓冲液50mL,蒸馏水50mL和30%过氧化氢(H(下标始)2(下标终)O(下标始)2(下标终)40μL)0.3mL同上湿育,最后每孔加2mol/L硫酸(H(下标始)2(下标终)SO(下标始)4(下标终)75μL终止反应将每样品3孔的液量吸至比色杯(杯径1cm),在分光光度仪上测量492nm波长处的光密度(OD)值每板均设阳性参考血清,阴性参考血清和空白对照孔测得样品OD值进行校正B2.2.2改良的间接ELISA:按适宜工作浓度用pH9.6的0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释抗原,包被40孔聚苯乙烯反应板,每孔加0.1mL,4℃过夜次日倾去抗原液,用pH7.2PBS/T洗涤3次,每次5min,甩干受检血样用PBS/T稀释成1∶200,每孔加0.1mL,每样本加2孔,置湿盒,37℃湿育30min,同上洗涤,甩干每孔加0.1mLPBS/T稀释的辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG,同上湿育,洗涤,甩干然后加底物溶液0.1mL,同上湿育后加2mol/L硫酸(H(下标始)2(下标终)SO(下标始)4(下标终)25μL终止反应用专用酶标检测仪(以PBS对照孔校正零点后)测定492(或490)nm波长的各孔OD值每板设阳性参考血清,阴性参考血清和PBS对照每样品的OD值以2孔的平均OD值计,再以同板的阳性参考血清OD值作校正B2.3反应标准测定100份以上降人的血清,求其OD值和标准差(SD),以OD均值加2SD作为阳性反应阈值(通常为0.4)当样品OD值等于或大于该值时即判为阳性或以样品OD值(P)和阴性参考血清OD值(N)的比值P/N≥2者为阳性B3溶液的配制B3.1pH8.0,0.01mol/LPBS液原液0.2mol/L磷酸盐缓冲液a.NaH(下标始)2(下标终)PO(下标始)4(下标终)·2H(下标始)2(下标终)O 15.6g蒸馏水加至 500mLb.Na(下标始)2(下标终)HPO(下标始)4(下标终)·12H(下标始)2(下标终)O 35.82g蒸馏水加至 500mL取a液5.3mL,b液94.7mL,NaCl17g加水至2000mLB3.2pH8.0缓冲甘油5份甘油(一级)和1份0.01mol/LPBS(pH8.0)混匀后冰箱保存(无气泡)B3.3pH9.6,0.05mol/L碳酸盐缓冲液Na(下标始)2(下标终)CO(下标始)3(下标终) 15.9gNaHCO(下标始)3(下标终) 2.93g蒸馏水加至 1000mLB3.4pH7.2PBS/吐温-20NaCl8.0gKH(下标始)2(下标终)PO(下标始)4(下标终) 0.2gNa(下标始)2(下标终)HPO(下标始)4(下标终)·12H(下标始)2(下标终)O 2.9gKCl0.2g吐温-200.5mL临用前加蒸馏水至1000mLB3.5pH5.0磷酸盐-柠檬酸缓冲液底物溶液0.1mol/L柠檬酸溶液(21.041g/L) 25.7mL0.2mol/LNa(下标始)2(下标终)HPO(下标始)4(下标终(28.4g/L) 24.3mL蒸馏水50mL邻苯二胺40mg临用前加30%过氧化氢(H(下标始)2(下标终)O(下标始)2(下标终) 40μL附录C对症治疗(参考件)C1急性丝虫病(肢体,阴囊,女性乳房)应用消炎镇痛药,急性症状缓解后停药对下肢急性淋巴结,淋巴管炎(流火)患者,如能于发作预兆期服消炎镇痛药,可明显减轻急性症状或制止发作合并细菌感染者需给予抗菌治疗C2慢性丝虫病C2.1肢体淋巴水肿,象皮肿烘绑疗法:对患肢采用辐射热或微波透热烘疗后用弹性绷带包扎每天1次,前者每次1h,20次为一疗程,休息半个月,进行下一疗程;后者每次30min,15次为一疗程,休息2个月,进行下一疗程在烘疗和休息期间,白天均需用弹性绷带持续包扎患肢,治疗2~3个疗程兼有足癣的患者,用抗霉菌治疗以控制霉菌感染C2.2乳磨尿一般治疗:发作期间注意休息,忌食油类,肉类和蛋类食物出现乳糜凝块,排尿困难和尿潴留者,应减少饮水量,以手按摩下腹部;或用中链油(MCT)代替普通食用油脂,能迅速解除病人痛苦MCT用量为成人每次服4~5g,每天3次,连服1月为一疗程,可间隔服2~3个疗程发作频繁,病情严重病例可采用硝酸银灌注或手术治疗C2.3鞘膜积液手术治疗:鞘膜积液量多者用鞘膜翻转术治疗附加说明:本标准由中华人民共和国卫生部提出本标准由中国预防医学科学院寄生虫病研究所负责起草本标准主要起草人孙德建,史宗俊,邓珊珊本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释以上回答如果满意,请不要辜负我的一片好意,及时点击采纳为答案
